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鸡胚成纤维细胞(UMNSAH/DF-1)

[更新日期:2018-04-17]
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  • 产品型号:
  • 原产地:上海
  • 品牌:jingkang
  • 价格:面议
  • 产品数量:1000
  • 产品关键字:鸡胚成纤维细胞(UMNSAHDF

上海晶抗生物工程有限公司

产品描述
品牌 jingkang 产品名称 大鼠肝细胞(BRL 3A)
用途类别 科研实验 贮存方法 避光保存
产地 上海
鸡胚成纤维细胞(UMNSAH/DF-1)
细胞介绍
该细胞是起源于10日龄的ELL-0鸡蛋的鸡细胞株,自发永生化。分离原代鸡胚成纤维细胞并在培养液中培养;传代直到衰老;在衰老过程中离心以保持细胞培养在30%到60%满;不衰老的克隆进行鉴定并传代不少于30次。在软琼脂上没有观察到克隆增殖,说明这些细胞是永生化而没有转化。该细胞可作为病毒增殖、组蛋白表达和重组病毒生产的基质。

细胞特性
1)来源:鸡胚
2)形态:成纤维细胞,贴壁生长
3)含量:>lxl06 个/mL
4)污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格:T25瓶或者lmL冻存管包装

鸡胚成纤维细胞(UMNSAH/DF-1)
细胞接受后的处理:
1.收到细胞后,请检查是否漏液,如果漏液,请拍照片发给我们。
2.请先在显微镜下确认细胞生长状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37°C培养约2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基,添加6ml本公司附带的完全培养基。
4.如果细胞长满(90%以上)请及时进行细胞传代,传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。
5.接到细胞次日,请检查细胞是否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。

细胞用途:仅供科研使用。
本公司的细胞培养操作规程,供参考
1)培养基及培养冻存条件准备:
1.准备DMEM培养基(DMEM,GIBCO,货号11995-065),90%;优质胎牛血清,10%。
2.培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37°C,培养箱湿度为 70%-80%。
3.冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
2)细胞处理:
复苏细胞:将含有lmL细胞悬液的冻存管迅速放入37°C水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入lmL培
养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

鸡胚成纤维细胞(UMNSAH/DF-1)

对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:

弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。力口 2m丨消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中,置于37°C培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部
分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3ml此细胞的培养基终止消化。轻轻吹打后吸出,移入15ml离心管中,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入lmL培养液后吹匀。
移入到事先准备好的含有5ml培养基的T-25培养瓶中或含有14ml培养基的T-75培养瓶中培养。
细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,先要消化处理并进行细胞计数。消化方法按照细胞传代方法的1-3步骤进行,最后的重悬液使用血清。悬浮细胞直接计数后离心,用血清重悬浮,加DMSO
至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每lml的数量分配到冻存管中。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。

注意事项:
收到细胞后,若发现干冰己挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。


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