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当前位置:   首页>精细化学品>生物试剂>细胞株类>小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14(MC3T3E1Subclonel4) [ 更新日期:2018-04-17 ]

小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14(MC3T3E1Subclonel4)

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价格:面议
品牌:jingkang
商品数量:1000
产品型号:
原产地:上海
所属系列:小鼠源性细胞
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经营性质:私营企业
联系电话:1352493****
所在区域:上海 闵行区
主营产品:ELISA试剂盒 生化试剂 标准品 对照品 细胞
基本参数
品牌

jingkang

产品名称

大鼠肝细胞(BRL 3A)

用途类别

科研实验

贮存方法

避光保存

产地

上海

详细说明

  小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14(MC3T3E1Subclonel4)

  细胞介绍

  从克隆的但是表型各异的MC3T3-E1细胞系中分离出一系列亚克隆。从含抗坏血酸培养基生长的成骨细胞中选择高或低成骨细胞分化、矿化的亚克隆。MC3T3亚克隆4(ATCCCRL-2593)和MC3T3亚克隆14(ATCCCRL-2594)在抗坏血酸和3到4mM无机磷酸盐中生长表现出高水平的成骨细胞分化。它们10天后形成一个矿化良好的细胞外基质(ECM)。MC3T3亚克隆24 (ATCCCRL-2595)和MC3T3 亚克隆30(ATCCCRL-2596)在抗坏血酸中生长表现出很差的成骨细胞分化。不形成 ECM,可以作为亚克隆4和14的阴性对照。矿化的亚克隆选择的表达作为成骨 细胞标记的mRNA,及唾液酸糖蛋白(BSP),骨钙素(OCN),和甲状旁腺激素/甲状 旁腺激素相关蛋白受体的mRNA。高或者低的分化潜能的亚克隆在培养中生产出 相似数量的胶原质,表达可比较的基本水平的mRNA编码Osf2/Cbfal,一种成骨 细胞相关转录因子。植入免疫缺陷小鼠以后,高分化性的亚克隆形成与骨类似的 形成小骨的编织骨,低分化细胞只是产生纤维组织。这些细胞系是研究体外成骨 细胞分化的好模型,尤其是ECM信号。它们和原代培养颅顶成骨细胞的行为类 似。

  细胞特性

  1)来源:颅顶骨

  2)形态:成纤维细胞

  3)含量:>lxl06个/mL

  4)污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

  5)规格:T25瓶或者lmL冻存管包装

  运输和保存:可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式:(1)干冰运输,收到后立即转入液氮冻存或直接复苏;(2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

  细胞用途:仅供科研使用。

  小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14(MC3T3E1Subclonel4)

  

  细胞培养步骤

  一.培养基及培养冻存条件准备:

  1)准备MEM a培养基(MEM a,GIBCO,货号12561-056);北美胎牛血清(United States,GIBCO,货号16000-044),10%。

  2) 培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37摄氏度,培养箱 湿度为70%-80%。

  3)冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。

  1. 复苏细胞:将含有lmL细胞悬液的冻存管在37°C水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加l-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入l〇cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检 查细胞密度。

  2.细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

  小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14(MC3T3E1Subclonel4)

  

  对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:

  弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

  力口2m丨消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中,置于37°C培

  养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

  按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加l-2mL培养液后吹匀。

  将细胞悬液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者 瓶中。

  3.细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约lml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加1〇%DMSO后进行冻存。

  注意事项:

  收到细胞后,若发现干冰己挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。

  所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

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